PKH26 Cell Linker Kit 細胞連接試劑盒
簡要描述:
PKH26 Cell Linker Kit 細胞連接試劑盒:(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于熒光探針PKH26,用于常規(guī)細胞膜標記的檢測試劑盒,適用于體外細胞標記,體外細胞增殖以及長期的體內細胞跟蹤研究等。
產品時間:2024-03-21
PKH26細胞連接試劑盒(用于常規(guī)細胞膜標記)
產品關鍵詞:
PKH26;Calcein AM 鈣黃綠素;PKH67;CFDA SE;In vivo cell tracking 體內細胞示蹤;Sigma MINI26;Phanos Technologies;
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling PKH26細胞連接試劑盒(用于常規(guī)細胞膜標記) | MX4021-100UL | 100μl | 2-8ºC避光保存 |
MX4021-200UL | 200μl | 2-8ºC避光保存 | |
MX4021-500UL | 500μl | 2-8ºC避光保存 |
產品描述
PKH26細胞連接試劑盒(用于常規(guī)細胞膜標記)(PKH26 Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling)是一款基于熒光探針PKH26,用于常規(guī)細胞膜標記的檢測試劑盒,適用于體外細胞標記,體外細胞增殖以及長期的體內細胞跟蹤研究等。
PKH26是一種的膜標記探針,結構上帶有一長脂肪族尾巴,能穩(wěn)定插入細胞膜脂質區(qū)域。PKH26熒光處于黃-橙色光譜區(qū)間(見圖1),大激發(fā)波長為551nm,大發(fā)射波長是567nm,與羅丹明或PE檢測系統(tǒng)兼容。也可能用標準熒光素(Fluorescein)激發(fā)濾片,但熒光強度可能會有些降低。PKH26具長的體內半衰期,超過100天,非常適用于體內細胞示蹤、細胞增殖研究和其他長期實驗。
稀釋液C(Diluent C)是本試劑盒配套提供的一種水溶性溶液,特別設計的一種標記媒介能維持細胞活力,同時大化染料溶解性和標記過程中的染色效率。Diluent C對哺乳動物細胞來說是等滲的,不含去污劑或有機溶劑,也不含生理鹽和緩沖劑。根據(jù)細胞類型,染料標記后膜的內在化程度,標記細胞可能呈現(xiàn)不同的狀態(tài),從明亮,到均勻點狀或斑駁狀。然而,PKH26熒光在生理范圍內不依賴于pH,且每個細胞的熒光強度通常不受染料位置的影響。
圖1. PKH26的激發(fā)和發(fā)射光譜圖
我司(懋康生物)提供三種規(guī)格的PKH26細胞連接試劑盒(用于常規(guī)細胞膜標記),其中:
Mini Kit(CAT#:MX4021-100UL)建議用于小量或初步研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測25次細胞樣本(2×107個細胞/次),和足量的Diluent C用于5次細胞樣本(2×107個細胞/次)。用戶需根據(jù)細胞類型和實驗目的來優(yōu)化確定加的染料濃度。
Midi Kit(CAT#:MX4021-200UL)適用于中量研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測50次細胞樣本(2×107個細胞/次),和足量的Diluent C用于30次細胞樣本(2×107個細胞/次)。用戶需根據(jù)細胞類型和實驗目的來優(yōu)化確定加的染料濃度。
Maxi Kit(CAT#:MX4021-500UL)適用于大量或體內研究。當使用2ml染色體積(含2μM 終濃度的PKH26),本試劑盒含有足量的染料用于檢測125次細胞樣本(2×107個細胞/次),和足量的Diluent C用于30次細胞樣本(2×107個細胞/次)。用戶需根據(jù)細胞類型和實驗目的來優(yōu)化確定加的染料濃度
產品包裝
組分 | 名稱 | 貨號(規(guī)格) | ||
MX4021-100UL | MX4021-200UL | MX4021-500UL | ||
MX4021-A | PKH26 Dye (1×10-3 M in EtOH) | 1×100μl | 2×100μl | 5×100μl |
MX4021-B | Diluent C | 1×10ml | 2×30ml | 2×30ml |
注意事項
1) PKH26是以溶于乙醇的儲存液形式提供,保存的過程中需避光并擰緊蓋子,以防止溶液揮發(fā)引起的染料濃度提高。使用前需檢查是否有結晶,若有結晶,需在37℃水浴溶晶,超聲或渦旋直至*溶解。
2) Diluent C使用前需置于室溫回溫之后再配制標記用的細胞和染料工作液。Diluent C是無菌溶液,不含任何防腐劑或抗生素,使用和保存過程中都注意無菌。
3) PKH26不能保存在Diluent C內,保存在Diluent C的染色工作液需在使用前配制,現(xiàn)配現(xiàn)用。
4) 熒光染料均存在淬滅問題,操作和儲存過程中需注意避光,以減緩熒光淬滅。
5) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟
一、 自行準備儀器和試劑(試劑盒不提供,用于常規(guī)細胞膜標記)
二、 常規(guī)細胞膜標記
【注意事項】:
1) 通過分配脂質染料進入細胞膜來進行標記。標記強度是染料濃度和細胞濃度共同作用的一種功能,且不會飽和。因此,用來標記的染料濃度需要有限,過度標記細胞會引起細胞膜完整性喪失和降低的細胞復原能力。
2) 以下步驟適用于體外或離體標記干細胞、淋巴細胞、單個核細胞、內皮細胞、神經元或任何需要將染料插入細胞膜脂質區(qū)的其他細胞類型。而體內標記、血小板標記,或在含非吞噬細胞的群體內選擇性標記吞噬細胞,需對步驟做適當修改。
3) 需在單克隆抗體染色前進行常規(guī)細胞膜染色。4℃單克隆抗體染色過程中膜染料仍能維持穩(wěn)定。然而,如果單抗標記后再室溫下進行常規(guī)細胞膜染色,極有可能引起單抗的“蓋帽”發(fā)生。
4) 以下步驟中用到的細胞和染料濃度是推薦用的起始濃度,廣譜適用于各種細胞類型。用戶需根據(jù)自身細胞類型和實驗目的確定加的染料和細胞濃度,通過對染色后細胞活力(比如典化丙啶排斥),熒光強度,染色均勻性和對待研究細胞功能無影響等方面來綜合評估。
5) PKH26染色過程中需避免疊氮化物或代謝毒物的存在。
6) 雖然粘附在固相基質上的貼壁細胞可能被標記,使用單細胞懸浮液能得到更勻質的染色結果。染色前使用蛋白消化酶比如胰酶/EDTA處理貼壁或結合細胞制備成分散的單細胞懸液能得到hao的染色結果。
【染色流程】:
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產品。
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